新闻中心 > 正文
最新播报:

新宝3注册q2688:水稻蛋白糖基化类型及植物特异性糖苷的免疫原性研究

2020/5/27 2:22:14 来源:新宝3注册q2688 阅读次数: 0

新宝3注册q2688最新报道

新宝3注册q2688水稻蛋白糖基化类型及植物特异性糖苷的免疫原性研究

【摘要】:植物蛋白的特异性糖苷修饰一直被怀疑具有潜在的免疫原性,进入人体后可能具有安全性风险,因而限制了它的进一步应用。 但这些数据均来自于叶片而不是种子,对种子蛋白的糖苷类型的研究非常有限,而关于其免疫原性的报道则基本没有。 水稻胚乳是一种经济有效的生物反应器,因此,研究种子和叶片的糖苷类型差异以及植物特异性糖苷的免疫原性,对水稻胚乳细胞生物反应器的应用具有重要意义。

在本研究中,为了探讨水稻胚乳细胞蛋白的糖苷修饰与叶片蛋白修饰间的差异以及植物特异性糖苷的免疫原性,我们首先获得了水稻胚乳特异性表达的人α-1,6-岩藻糖转移酶(FUT8)基因和β-1,4-半乳糖转移酶(GalT)基因水稻品系。 为了加快育种进程,我们优化了一种利用水稻基因RBE4作为内参的定量PCR法,用于快速准确地筛选纯合子单株和鉴定转基因的拷贝数。

通过杂交,把FUT8、GalT和hAAT(人α抗胰蛋白酶)这三个基因聚合起来,获得了部分人源化糖苷修饰的AAT转基因水稻品系,然后比较了不同糖苷修饰的AAT的糖基化结构,并对其免疫原性做出评价。

主要研究结果如下:1.通过MALDI-TOFMS分析,我们发现水稻叶片和种子蛋白的糖苷修饰存在很大差异。

种子糖蛋白中同时含有α-1,3-岩藻糖和β-1,2-木糖的结构占总糖苷的%,而叶片中为%;但是种子中仅含有β-1,2-木糖(不含α-1,3-岩藻糖)的结构有%,而叶片中只有%。

2.我们将两个引入人类特异性N-连接糖苷修饰的α-1,6-岩藻糖转移酶基因和β-1,4-半乳糖转移酶基因——FUT8和GalT利用胚乳特异性启动子Glb转入水稻基因组中。 通过MALDI-TOFMS分析,转基因水稻的储藏蛋白谷蛋白中可检测到%的α-1,6-岩藻糖和%的β-1,4-半乳糖。 3.我们发现内源储藏蛋白谷蛋白和重组蛋白OsrAAT的糖苷结构都比较单一。 但是谷蛋白中最主要的结构是MMX,而OsrAAT中最主要的结构是MXF,这两种结构几乎都占据了各自全部N-连接糖苷的50%。 4.我们将FUT8、GalT和hAAT这三个基因聚合后发现,部分人源化AAT(mgOsrAAT)中含有%的α-1,6-岩藻糖,并且α-1,3-岩藻糖的含量由植物源AAT(OsrAAT)中的%下降至mgOsrAAT中的%。 5.我们在动物体内检验了OsrAAT、mgOsrAAT和hAAT的免疫原性,结果发现这三者之间IgG、IgM和IgE滴度没有明显区别。 6,豚鼠皮肤被动过敏反应(PCA)显示,植物特异性糖苷具有较弱的免疫原性,进一步分析显示其免疫原性主要来自α-1,3-岩藻糖而不是β-1,2-木糖。

7.我们通过检测α-1,3-岩藻糖和β-1,2-木糖特异性抗体的抗体浓度,发现这三种蛋白免疫的兔血清间的抗体主要由α-1,3-岩藻糖产生。

文献检索发现α-1,3-岩藻糖并不是植物特异性糖苷,因而推断植物蛋白的α-1,3-岩藻糖修饰并不会产生任何安全风险。

8.在本研究中,我们优化了一种利用水稻内源基因RBE4作为内参基因,检测效率和准确性都很高的鉴定纯合子和拷贝数的方法。 该方法鉴定的纯合子在单插入位点的准确性达到100%,双插入位点的准确性达到%。

通过本研究,我们发现植物糖苷的免疫原性较弱,且其免疫原性主要是由α-1,3-岩藻糖产生,而非β-1,2-木糖。

鉴于临床应用的AAT中同样含有α-1,3-岩藻糖,我们推测植物糖苷对人体是安全的。

【学位授予单位】:武汉大学【学位级别】:博士【学位授予年份】:2017【分类号】:S511。

新宝3注册q2688水稻蛋白糖基化类型及植物特异性糖苷的免疫原性研究2、网上互动在微博或朋友圈中,一些评论或转发会出现诸如姓名、职务等信息,对此互动要注意保护隐私。3、社交账户在社交账户上如实填写个人信息(姓名、手机号、住址、学校等),会被别有用心的人盯上,所以要谨慎填写身份信息。4、“个性化服务”不少商家通过手机客户端定位用户,推送商品或服务,用户被实时“监控”。

上一篇:5G传输、视频采访……“云”上的两会更安全更高效 下一篇:没有了

  • 9月访港旅客按年连跌3个月 内地旅客下降35%
  • 博狗体育场河南被传“行长跑路”银行原董事长康凤立被查
  • 新宝3国际娱乐平台中国驻美大使:为什么总有人试图挑战中国底线?
  • 嫌囚衣太丑没吹风机洗不了头 女贪官大哭:我要回家
  • 蔡英文想参加五月天演唱会?网友:她别到处害人!
  • 香港民众不满辱国旗者被轻判 呼吁政府提出上诉
  • 司机被黄牛收钱后万元罚款减半 山西祁县:正在调查
  • 5个月后香港首富李嘉诚终于行动 港府表态
  • hg0088开户11月新规来了:网络平台泄露信息500条以上可入罪
  • 广西南丹矿山冒顶事故仍在救援 8名相关人员被刑拘
  • 新宝3注册q2688水稻蛋白糖基化类型及植物特异性糖苷的免疫原性研究
  • 新宝3注册q26885G传输、视频采访……“云”上的两会更安全更高效
  • 新宝3注册q2688世界杯2022直播频道我国环境违法案件移送法律制度研究
  • 新宝3注册q2688陈薇团队疫苗最新重磅!中国疫苗全球领跑!世界首个新冠疫苗人体临床数据公布:全部产生免疫应答,相关概念股要起飞?
  • 新宝3注册q2688注册送体验金 pt88.vipXinhua Espaol Información global en espaol. Actualidad, China, internacional, iberoamérica,economía, deportes, sociedad, opinión, comidas, viajes.
  • 新宝3注册q2688电务壮歌动甬城 优质精品扬美名
  • 新宝3注册q268837年头一回 村上春树开新闻发布会
  • 新宝3注册q2688广西壮族自治区疾控中心到邕武东社区开展艾滋病知识知晓率调查工作
  • 新宝3注册q2688迅雷7(Thunder)V7.2.13.3884 Dreamcast去广告优化版
  • 新宝3注册q2688网易高管解读财报:网易云音乐营收实现三位数增长!
  • [责任编辑:admin]

    Copyright @ 2000 - 2019 208.85 All Rights Reserved.  制作单位:新华网

    本站导航:造纸纸品 冶金钢铁 纺织服装 供水燃气 政府机构 安防消防

    版权所有 新华网